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- 1. S0013 - 10%三氯化鐵溶液
- 2. S0001 - Kovacs氏靛基質(zhì)試劑/柯凡克試劑 Kovacs Indole Regent
- 3. S0025 - 班氏試劑/Benedict氏定性試劑
- 4. S0005 - V-P試劑/VP試劑 Voges-Proskauer reagents
- 5. C0116 - 安瓿瓶試驗盒
山東拓普生物工程有限公司
Shandong Tuopu Biol-Engineering Co.,Ltd
腸桿菌科細(xì)菌生化鑒定套裝使用說明書
【產(chǎn)品名稱】T141 腸桿菌科細(xì)菌生化鑒定套裝15種(第二代15e)
【包裝規(guī)格】17支/套 1套/盒 10套/包(10盒)
【產(chǎn)品用途】用于腸桿菌科細(xì)菌生化鑒定(應(yīng)滿足革蘭氏染色陰性,氧化酶陰性,葡萄糖發(fā)酵陽性)
【貯藏條件】2-8℃避光保存1年
【使用方法】1、從純化平板上挑取待檢菌落于生理鹽水中,制備成約0.5麥?zhǔn)蠞岫鹊木鷳乙海?、使用配套砂輪劃割安瓿瓶藍(lán)點正下方瓶頸處,背向藍(lán)點掰開安瓿瓶(戴手套操作),放入安瓿瓶試驗盒中;3、移液器移取100ul菌懸液加至安瓿瓶中(斜面生化管需沿斜面滴加菌懸液),葡萄糖酸鹽氧化實驗、半固體瓊脂、葡萄糖半固體發(fā)酵管請單獨按照注意事項接種操作;4、36±1℃培養(yǎng),具體培養(yǎng)時間見下表,出現(xiàn)陽性結(jié)果后即可停止培養(yǎng);5、判斷實驗結(jié)果,依照說明書中示例的計算方法將鑒定結(jié)果填入鑒定表中,計算得到鑒定編碼;6、查編碼冊,得到鑒定結(jié)果,如您無編碼冊,可將編碼告知我司代為查詢。
【重要聲明】使用本品時,并不是所有的編碼均有鑒定結(jié)果。這是因為有些生化反應(yīng)模式不可能出現(xiàn)或目前尚未認(rèn)識有這樣的菌種。在設(shè)計本編碼時,以刪繁就簡為原則,在項目的排列上以合理為最佳選擇。在使用時,如發(fā)現(xiàn)查不到鑒定結(jié)果,可重復(fù)鑒定一次或仔細(xì)分析生化實驗現(xiàn)象以確保判斷的生化反應(yīng)結(jié)果無誤;如果實驗沒有問題,可結(jié)合16SRNA等鑒定方法進(jìn)行綜合判斷。
【套裝組成及判斷方法】
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編號 |
產(chǎn)品名稱 |
培養(yǎng)時間 |
陽性結(jié)果 |
陰性結(jié)果 |
第 1 組 |
T157 |
硫化氫試驗培養(yǎng)基(不含瓊脂) |
1-2天 |
黑色 |
不變黑 |
T118 |
苯丙氨酸培養(yǎng)基 |
1-2天 |
綠色(見注意事項1) |
其它顏色 |
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T142 |
葡萄糖酸鹽氧化實驗 |
1-2天 |
見注意事項2 |
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第 2 組 |
T003 |
蛋白胨水(色氨酸肉湯) |
1-2天 |
紅色(見注意事項3) |
無紅色 |
T001 |
緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP) |
1-2天 |
紅色(見注意事項4) |
無紅色 |
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T013 |
西蒙氏檸檬酸鹽瓊脂 |
1-4天 |
藍(lán)色 |
綠色 |
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第 3 組 |
T005 |
尿素瓊脂斜面 |
1-2天 |
深紅色或紫紅色 |
黃色或不變色(淺紅色) |
T004 |
半固體瓊脂 |
1-2天 |
擴(kuò)散生長(見注意事項5) |
不擴(kuò)散生長 |
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T024 |
葡萄糖半固體發(fā)酵管 |
1-2天 |
黃色,產(chǎn)氣(見注意事項6) |
不產(chǎn)氣 |
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第 4 組 |
T008 |
賴氨酸脫羧酶肉湯 |
1-2天 |
對照管黃色-灰紫色 肉湯管紫色 (見注意事項7)
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對照管黃色,肉湯管黃色 或 對照管與肉湯管均為淺灰紫色
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T012 |
鳥氨酸脫羧酶肉湯 |
1-2天 |
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T009 |
氨基酸脫羧酶對照 |
1-2天 |
|||
T011 |
無菌液體石蠟 |
1-2天 |
|||
T015 |
棉子糖發(fā)酵管 |
1-2天 |
黃綠色-黃色 |
綠色或藍(lán)色 |
|
第 5 組 |
T014 |
山梨醇發(fā)酵管 |
1-2天 |
黃綠色-黃色 |
綠色或藍(lán)色 |
T121 |
側(cè)金盞花醇發(fā)酵管 |
1-2天 |
黃綠色-黃色 |
綠色或藍(lán)色 |
|
T039 |
木糖發(fā)酵管 |
1-2天 |
黃綠色-黃色 |
綠色或藍(lán)色 |
【所需配套產(chǎn)品】
S0013--10%三氯化鐵溶液;S0025--班氏試劑;S0001--Kovacs氏靛基質(zhì)試劑; S0006--甲基紅試劑;
C0116--安瓿瓶試驗盒
【注意事項】
1、苯丙氨酸培養(yǎng)基:培養(yǎng)結(jié)束后,取出10%三氯化鐵溶液,輕輕搖勻,滴加2~3滴于培養(yǎng)結(jié)束的苯丙氨酸瓊脂斜面,使其沿斜面流下。
2、葡萄糖酸鹽氧化實驗: 接種大量新鮮待測純培養(yǎng)物(菌苔/菌落)于生化管中,培養(yǎng)后滴加班氏試劑(S0025)1ml,充分搖勻;使用鑷子等夾住試驗管于沸水中加熱10分鐘,靜置15-30分鐘后觀察結(jié)果;出現(xiàn)黃色-茶色-橙紅色沉淀為陽性,仍保持藍(lán)色或藍(lán)綠色為陰性。
3、 蛋白胨水(色氨酸肉湯)用于靛基質(zhì)實驗,培養(yǎng)結(jié)束后滴加Kovacs氏靛基質(zhì)試劑(S0001)2~4滴,立即觀察結(jié)果。出現(xiàn)紅色為陽性,無紅色為陰性。
4、緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP)用于甲基紅實驗:培養(yǎng)結(jié)束后,滴加2~3滴甲基紅試劑(S0006),輕輕震蕩,立即觀察結(jié)果,出現(xiàn)紅色為陽性,無紅色為陰性。
5、半固體瓊脂用于動力實驗:使用接種針挑取菌苔直立穿刺接種,需保證接種針在培養(yǎng)基內(nèi)直線穿刺不發(fā)生左右偏移。培養(yǎng)結(jié)束后觀察穿刺線上細(xì)菌的生長情況,若細(xì)菌僅在穿刺線生長,則無動力;若細(xì)菌有沿穿刺線向四周擴(kuò)散生長的現(xiàn)象,有動力。
6、葡萄糖半固體發(fā)酵管用于產(chǎn)氣實驗:使用接種針挑取菌苔直立穿刺接種。培養(yǎng)結(jié)束后觀察結(jié)果。如瓊脂內(nèi)有氣體或發(fā)生破裂,則為陽性反應(yīng);沒有氣體為陰性反應(yīng)。
7、賴氨酸脫羧酶肉湯、鳥氨酸脫羧酶肉湯和氨基酸脫羧酶對照三支生化管接菌后應(yīng)立即覆蓋200-300ul的無菌液體石蠟,然后培養(yǎng)。按上表結(jié)合對照管一起觀察結(jié)果。本實驗有時較難判斷,建議于10h、20h、30h、40h左右多次觀察結(jié)果,結(jié)合對照管的顏色變化進(jìn)行綜合判斷。
8、關(guān)于培養(yǎng)時間的說明:培養(yǎng)時間為1-2天,多數(shù)細(xì)菌繁殖較快,培養(yǎng)1天即可;如確實無法判斷細(xì)菌繁殖快慢,實際操作時可培養(yǎng)兩天,但是建議在培養(yǎng)10h、20h、30h、40h左右聯(lián)系觀察記錄實驗結(jié)果。對于糖醇發(fā)酵管而言,培養(yǎng)過程中如出現(xiàn)陽性反應(yīng),即使長時間培養(yǎng)后,黃色等顏色變回綠色,仍應(yīng)判陽性反應(yīng)。
9、本品附帶4頁鑒定表,每頁3張,共計12張,用于鑒定結(jié)果的記錄。
10、應(yīng)急處置:使用時應(yīng)佩戴手套,如不慎與身體直接接觸,應(yīng)立即用水沖洗至少15分鐘。
11、本品僅用于微生物檢測,不用于體外診斷。
【編碼示例】
1、 將判斷得到的生化反應(yīng)結(jié)果填入下表,陽性結(jié)果為“+”,陰性結(jié)果為“-”。
2、 單值指的是預(yù)先賦予該實驗項目的數(shù)值,只有當(dāng)該實驗項目呈陽性反應(yīng)時方可計入。
3、 將實驗分成了5組,分組計算各自陽性反應(yīng)對應(yīng)的單值之和得到總值。
實 驗 項 目 |
第1組 |
第2組 |
第3組 |
第4組 |
第5組 |
||||||||||
硫化氫 |
苯丙氨酸 |
葡萄糖酸鹽 |
靛基質(zhì) |
甲基紅 |
檸檬酸鹽 |
尿素 |
動力 |
葡萄糖產(chǎn)氣 |
賴氨酸 |
鳥氨酸 |
棉子糖 |
山梨醇 |
側(cè)金盞花醇 |
木糖 |
|
結(jié)果(+/-) |
- |
- |
+ |
+ |
- |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
單值 |
4 |
2 |
1 |
4 |
2 |
1 |
4 |
2 |
1 |
4 |
2 |
1 |
4 |
2 |
1 |
總值 |
1 |
5 |
1 |
5 |
7 |
||||||||||
鑒定碼為15157,查詢編碼冊得到鑒定結(jié)果為:產(chǎn)酸克雷伯氏菌 |
- 1. T215 - 硝酸鹽還原管硝酸鹽還原管(枯草芽孢桿菌)
- 2. T114 - 副溶血性弧菌套裝生化鑒定管16種
- 3. T083 - 0.5%棉子糖發(fā)酵管(乳酸菌)
- 4. T196 - 菊糖發(fā)酵管(酵母菌) Inulin
- 5. T202 - 綠膿菌素測定用培養(yǎng)基(PDP) Pseudomonas Agar Medium Base for Determine of Pyocyanin
- 6. T005 - 尿素瓊脂斜面 Urease Agar
- 7. T216 - 淀粉水解管淀粉水解管(枯草芽孢桿菌)
- 8. T109 - 大腸桿菌O157:H7套裝生化鑒定管10種
- 9. T088 - 6.5%氯化鈉肉湯 6.5% NaCl Broth
- 10. T175 - 0.5%甘油發(fā)酵管(乳酸菌)