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DSF群體淬滅及調(diào)控機制研究獲新進展
[所屬分類:行業(yè)動態(tài)] [發(fā)布時間:2023-1-4] [發(fā)布人:網(wǎng)站管理員2] [閱讀次數(shù):] [返回]
DSF群體淬滅及調(diào)控機制研究獲新進展
作者：朱漢斌 來源：中國科學報
山東拓普生物工程有限公司 http://www.jinhuabanruo.cn
近日，華南農(nóng)業(yè)大學群體微生物研究中心教授張煉輝團隊在DSF（diffusible signal factor）群體淬滅及調(diào)控機制方面取得新進展。他們報道了一個關(guān)鍵的調(diào)控因子RdmA及其調(diào)控的代謝基因簇dmgA-H在DSF群體淬滅過程中的重要作用。相關(guān)研究發(fā)表于mBio。博士后研究員王惠杉為該論文第一作者，張煉輝教授和廖立勝副教授為通訊作者。
群體感應(yīng)（Quorum sensing，QS）是一種微生物的胞間分子通訊機制，微生物通過合成、分泌、響應(yīng)具有擴散性的小分子信號化合物協(xié)調(diào)種內(nèi)或種間微生物群體的各種生物學功能。病原微生物通過群體感應(yīng)調(diào)控群體的毒力因子產(chǎn)生從而強化致病能力，導致嚴重的人類和動植物病害，造成不可估量的社會不安和經(jīng)濟損失。
其中，最早報道的AHL（acylhomoserine lactone）信號和相對后期才發(fā)現(xiàn)的DSF代表了兩類廣泛存在于革蘭氏陰性細菌的群體感應(yīng)家族信號，它們均參與調(diào)控多種病原菌的致病過程，包括產(chǎn)生各種致病因子及致病力等。群體淬滅（Quorum quenching，QQ）是指干擾或阻斷群體感應(yīng)通訊的分子機制。群體感應(yīng)淬滅已被越來越多研究證明是一種有效的病害防控新策略、新途徑。早期群體淬滅研究主要針對AHL群體感應(yīng)系統(tǒng)，DSF群體淬滅研究近年來才起步，其調(diào)控機制方面的研究鮮有報道。
張煉輝團隊前期發(fā)現(xiàn)Pseudomonas nitroreducens HS-18的DSF淬滅基因表達受DSF的誘導調(diào)控，為闡明其調(diào)控機制，團隊通過RNA-seq比較分析，篩選出了20個轉(zhuǎn)錄水平顯著受DSF信號分子影響的調(diào)控因子，并利用報告系統(tǒng)HS-18（digA::lacZ），篩選出了對DSF淬滅基因digA具有相對最顯著調(diào)控作用的調(diào)控因子RdmA。通過蛋白結(jié)構(gòu)域分析發(fā)現(xiàn)，RdmA屬于同時具有配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域和DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域的TetR家族轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，團隊通過基因敲除、RT-qPCR、DSF生物測定等方法，在rdmA鄰位發(fā)現(xiàn)了關(guān)鍵的DSF淬滅代謝基因簇dmgA-H。
RT-qPCR分析表明，RdmA顯著負調(diào)控dmgA-H的轉(zhuǎn)錄水平；進一步，研究團隊通過RT-qPCR、凝膠阻滯實驗（EMSA）證明，當DSF信號不存在時，RdmA蛋白能夠直接結(jié)合dmgA啟動子區(qū)域，抑制了dmgA-H的轉(zhuǎn)錄水平；當DSF信號存在時，DSF結(jié)合游離的RdmA蛋白及PdmgA-RdmA復合物中的RdmA蛋白，從而解離/阻止RdmA蛋白與dmgA啟動子區(qū)域的結(jié)合，從而激活dmgA-H的轉(zhuǎn)錄。
張煉輝團隊發(fā)現(xiàn)，dmgA啟動子區(qū)域中的2個反向重復序列&ldquo；AGCAAGCGCTTGG&rdquo和&ldquo；CCAAGCGCTTGCT&rdquo，對RdmA結(jié)合dmgA啟動子區(qū)域至關(guān)重要。究團隊還利用了多種DSF結(jié)構(gòu)類似化合物對RdmA的配體特異性進行了分析，結(jié)果表明，DSF家族信號（DSF、BDSF、PDSF）對digA和dmgA的轉(zhuǎn)錄調(diào)控最顯著。DSF信號分子、調(diào)控因子RdmA和dmgA-H的互作關(guān)系清晰揭示了一個由調(diào)控因子RdmA介導的DSF淬滅調(diào)控新機制。
該研究為創(chuàng)制高效高能的DSF淬滅菌株奠定了重要理論與應(yīng)用基礎(chǔ)。
上述研究得到國家自然科學基金、廣東省基礎(chǔ)與應(yīng)用基礎(chǔ)研究基金、廣東省林業(yè)科技創(chuàng)新項目重點項目、廣東省重點領(lǐng)域研發(fā)計劃等項目的資助。
相關(guān)論文信息：https://doi.org/10.1128/mbio.03010-22
（本文內(nèi)容來源于網(wǎng)絡(luò)，版權(quán)歸原作者所有，如有侵權(quán)可后臺聯(lián)系刪除。）
作者：朱漢斌 來源：中國科學報
山東拓普生物工程有限公司 http://www.jinhuabanruo.cn
近日，華南農(nóng)業(yè)大學群體微生物研究中心教授張煉輝團隊在DSF（diffusible signal factor）群體淬滅及調(diào)控機制方面取得新進展。他們報道了一個關(guān)鍵的調(diào)控因子RdmA及其調(diào)控的代謝基因簇dmgA-H在DSF群體淬滅過程中的重要作用。相關(guān)研究發(fā)表于mBio。博士后研究員王惠杉為該論文第一作者，張煉輝教授和廖立勝副教授為通訊作者。
群體感應(yīng)（Quorum sensing，QS）是一種微生物的胞間分子通訊機制，微生物通過合成、分泌、響應(yīng)具有擴散性的小分子信號化合物協(xié)調(diào)種內(nèi)或種間微生物群體的各種生物學功能。病原微生物通過群體感應(yīng)調(diào)控群體的毒力因子產(chǎn)生從而強化致病能力，導致嚴重的人類和動植物病害，造成不可估量的社會不安和經(jīng)濟損失。
其中，最早報道的AHL（acylhomoserine lactone）信號和相對后期才發(fā)現(xiàn)的DSF代表了兩類廣泛存在于革蘭氏陰性細菌的群體感應(yīng)家族信號，它們均參與調(diào)控多種病原菌的致病過程，包括產(chǎn)生各種致病因子及致病力等。群體淬滅（Quorum quenching，QQ）是指干擾或阻斷群體感應(yīng)通訊的分子機制。群體感應(yīng)淬滅已被越來越多研究證明是一種有效的病害防控新策略、新途徑。早期群體淬滅研究主要針對AHL群體感應(yīng)系統(tǒng)，DSF群體淬滅研究近年來才起步，其調(diào)控機制方面的研究鮮有報道。
張煉輝團隊前期發(fā)現(xiàn)Pseudomonas nitroreducens HS-18的DSF淬滅基因表達受DSF的誘導調(diào)控，為闡明其調(diào)控機制，團隊通過RNA-seq比較分析，篩選出了20個轉(zhuǎn)錄水平顯著受DSF信號分子影響的調(diào)控因子，并利用報告系統(tǒng)HS-18（digA::lacZ），篩選出了對DSF淬滅基因digA具有相對最顯著調(diào)控作用的調(diào)控因子RdmA。通過蛋白結(jié)構(gòu)域分析發(fā)現(xiàn)，RdmA屬于同時具有配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域和DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域的TetR家族轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，團隊通過基因敲除、RT-qPCR、DSF生物測定等方法，在rdmA鄰位發(fā)現(xiàn)了關(guān)鍵的DSF淬滅代謝基因簇dmgA-H。
RT-qPCR分析表明，RdmA顯著負調(diào)控dmgA-H的轉(zhuǎn)錄水平；進一步，研究團隊通過RT-qPCR、凝膠阻滯實驗（EMSA）證明，當DSF信號不存在時，RdmA蛋白能夠直接結(jié)合dmgA啟動子區(qū)域，抑制了dmgA-H的轉(zhuǎn)錄水平；當DSF信號存在時，DSF結(jié)合游離的RdmA蛋白及PdmgA-RdmA復合物中的RdmA蛋白，從而解離/阻止RdmA蛋白與dmgA啟動子區(qū)域的結(jié)合，從而激活dmgA-H的轉(zhuǎn)錄。
張煉輝團隊發(fā)現(xiàn)，dmgA啟動子區(qū)域中的2個反向重復序列&ldquo；AGCAAGCGCTTGG&rdquo和&ldquo；CCAAGCGCTTGCT&rdquo，對RdmA結(jié)合dmgA啟動子區(qū)域至關(guān)重要。究團隊還利用了多種DSF結(jié)構(gòu)類似化合物對RdmA的配體特異性進行了分析，結(jié)果表明，DSF家族信號（DSF、BDSF、PDSF）對digA和dmgA的轉(zhuǎn)錄調(diào)控最顯著。DSF信號分子、調(diào)控因子RdmA和dmgA-H的互作關(guān)系清晰揭示了一個由調(diào)控因子RdmA介導的DSF淬滅調(diào)控新機制。
該研究為創(chuàng)制高效高能的DSF淬滅菌株奠定了重要理論與應(yīng)用基礎(chǔ)。
上述研究得到國家自然科學基金、廣東省基礎(chǔ)與應(yīng)用基礎(chǔ)研究基金、廣東省林業(yè)科技創(chuàng)新項目重點項目、廣東省重點領(lǐng)域研發(fā)計劃等項目的資助。
相關(guān)論文信息：https://doi.org/10.1128/mbio.03010-22
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